به عنوان تأمین کننده Bacillus subtilis ، اغلب در مورد مناسب ترین رسانه های کشت برای کشت این باکتری قابل توجه سؤال می شود. Bacillus subtilis یک باکتری گرم - مثبت ، میله ای است که به دلیل طیف گسترده ای از کاربردهای خود شناخته شده است ، از تولید آنزیم صنعتی گرفته تا مصارف کشاورزی به عنوان یک عامل بیوکنترل. در این وبلاگ ، من به رسانه های مختلف فرهنگ که مناسب برای رشد باسیلوس subtilis مناسب هستند ، می پردازم.
مواد مغذی - رسانه های عمومی غنی
یکی از متداول ترین رسانه ها برای کشت باسیلوس subtilis ، مواد مغذی آگار (NA) و آبگوشت مغذی (NB) است. آگار مغذی یک ماده جامد است ، در حالی که آبگوشت مغذی مایع است. این رسانه ها از مواد مغذی اساسی مانند پپتون ، عصاره گوشت گاو و کلرید سدیم تشکیل شده اند. پپتون منبع نیتروژن را به شکل اسیدهای آمینه و پپتیدها فراهم می کند ، که برای سنتز پروتئین های باکتریایی ضروری هستند. عصاره گوشت گاو حاوی ویتامین ها ، کربوهیدرات ها و سایر عوامل رشد است. کلرید سدیم به حفظ تعادل اسمزی محیط کمک می کند.
Bacillus subtilis به خوبی در آگار مغذی رشد می کند و مستعمرهایی را تشکیل می دهد که به طور معمول از نظر شکل بزرگ ، مسطح و نامنظم هستند. در آبگوشت مغذی ، باعث کدورت می شود زیرا چند برابر می شود. سادگی و هزینه - اثربخشی این رسانه ها ، آنها را به یک انتخاب محبوب در آزمایشگاه ها برای کشت روتین باسیلوس subtilis تبدیل می کند.
رسانه های مصنوعی
رسانه های مصنوعی با اجزای شیمیایی تعریف شده تدوین می شوند. آنها هنگامی مفید هستند که محققان نیاز به کنترل دقیق مواد مغذی در دسترس باکتری ها دارند. برای Bacillus subtilis ، یک محیط مصنوعی ممکن است حاوی نمک های معدنی مانند فسفات پتاسیم ، سولفات منیزیم و سولفات آمونیوم به همراه یک منبع کربن مانند گلوکز باشد.
مزیت رسانه های مصنوعی این است که آنها امکان مطالعه نیازهای غذایی خاص باسیلوس subtilis را فراهم می کنند. به عنوان مثال ، با تغییر غلظت یک ماده مغذی خاص ، دانشمندان می توانند تعیین کنند که چگونه این میزان بر رشد ، اسپور سازی یا تولید متابولیت باکتری تأثیر می گذارد. با این حال ، تهیه رسانه های مصنوعی می تواند زمان بیشتری باشد - مصرف و گران در مقایسه با رسانه های عمومی.
رسانه های انتخابی
در بعضی موارد ، جداسازی باسیلوس subtilis از یک فرهنگ مختلط ضروری است. رسانه های انتخابی برای مهار رشد سایر میکروارگانیسم ها در حالی که به باسیلوس subtilis اجازه می دهند طراحی شوند. یکی از این رسانه های انتخابی ، نمک مانیتول آگار (MSA) است. اگرچه MSA معمولاً برای جداسازی گونه های استافیلوکوک استفاده می شود ، اما می توان از آن برای انتخاب برای باسیلوس subtilis تا حدی استفاده کرد.
MSA حاوی غلظت بالایی از نمک (7.5 ٪ کلرید سدیم) است که مانع از رشد بسیاری از باکتری های غیر هولوتانتانت می شود. مانیتول منبع کربوهیدرات در محیط است و باسیلوس subtilis می تواند مانیتول را تخمیر کند و اسیدی تولید می کند که باعث تغییر در رنگ نشانگر pH در محیط می شود. این خاصیت می تواند برای تمایز باسیلوس subtilis از سایر باکتری هایی که ممکن است در نمونه وجود داشته باشد استفاده شود.
رسانه غنی شده
از رسانه های غنی شده برای ترویج رشد باکتری های سریع یا برای تقویت رشد یک میکروارگانیسم خاص استفاده می شود. برای باسیلوس subtilis ، می توان از آگار خون به عنوان یک محیط غنی شده استفاده کرد. آگار خون حاوی یک محیط پایه (معمولاً آگار مغذی) است که دارای 5 تا 10 ٪ گوسفند یا خون اسب است.
خون مواد مغذی اضافی مانند همین و فاکتورهای رشد را فراهم می کند که می تواند رشد باسیلوس subtilis را تحریک کند. برخی از گونه های باسیلوس subtilis ممکن است بتا - همولیز در آگار خون ، که لیز کامل گلبول های قرمز است ، نشان دهد و در نتیجه یک منطقه روشن در اطراف مستعمرات ایجاد شود. این فعالیت همولیتیک می تواند یک ویژگی مهم برای شناسایی سویه های خاص باشد.
رسانه برای تولید صنعتی
در یک محیط صنعتی ، انتخاب رسانه های کشت برای باسیلوس subtilis اغلب با هزینه ، مقیاس پذیری و محصول نهایی مورد نظر هدایت می شود. برای تولید آنزیم ها ، مانند پروتئازها و آمیلازها ، رسانه های حاوی منابع کربن و نیتروژن ارزان قیمت ترجیح داده می شوند. به عنوان مثال ، مشروبات الکلی شیب دار ذرت ، محصول - محصول ذرت - مرطوب - می تواند به عنوان منبع نیتروژن استفاده شود. سرشار از اسیدهای آمینه ، پپتیدها و ویتامین ها است.
از نشاسته می توان به عنوان منبع کربن استفاده کرد ، به خصوص هنگام تولید آمیلاز. استفاده از این رسانه های صنعتی نه تنها هزینه تولید را کاهش می دهد بلکه امکان کشت در مقیاس بزرگ باسیلوس subtilis را نیز فراهم می کند.
رسانه های تخصصی برای اسپور سازی
Bacillus subtilis توانایی تشکیل اسپورها را در شرایط خاص دارد. اسپورها در برابر فشارهای محیطی بسیار مقاوم هستند و برای بقای طولانی مدت باکتری از اهمیت برخوردار هستند. برای القاء اسپور سازی ، می توان از رسانه هایی مانند Schaeffer - Fulton Medium استفاده کرد.
این محیط حاوی مؤلفه هایی است که باعث ایجاد فرآیند اسپور سازی می شود ، مانند یون های کلسیم و اسیدهای آمینه خاص. شکل گیری اسپورها را می توان با استفاده از تکنیک های رنگ آمیزی مانند لکه های اسپور Schaeffer - Fulton ، که بین سلولهای رویشی و اسپورها تمایز قایل شده است ، تجسم کرد.
در مقایسه با گونه های باسیل مرتبط
جالب است بدانید که تفاوت در نیازهای رسانه های کشت باسیلوس subtilis در مقایسه با گونه های مرتبط مانندباسیلوس مگاتیمباBacillus licheniformis (کشاورزی)وتباسیلوس mucilaginosus krassilnikovبشر در حالی که بسیاری از رسانه های عمومی مانند آگار مغذی و آبگوشت مواد مغذی می توانند از رشد این گونه های باسیلوس پشتیبانی کنند ، هر یک ممکن است ترجیحات غذایی منحصر به فرد داشته باشند.
به عنوان مثال ، Bacillus megaterium ممکن است برای رشد بهینه به غلظت کمی بالاتر از اسیدهای آمینه خاص نیاز داشته باشد ، در حالی که باسیلوس licheniformis ممکن است در استفاده از کربوهیدراتهای پیچیده کارآمدتر باشد. درک این تفاوت ها می تواند در کشت انتخابی و شناسایی این گونه ها در یک نمونه مختلط کمک کند.
پایان
در پایان ، انتخاب رسانه های کشت برای باسیلوس subtilis به هدف کشت بستگی دارد. این که آیا این کار برای کارهای روزمره آزمایشگاهی ، تحقیقات در مورد خصوصیات فیزیولوژیکی آن ، تولید صنعتی آنزیم ها یا انزوا از یک فرهنگ مختلط است ، رسانه های مختلفی در دسترس هستند. هر نوع رسانه مزایا و معایب خاص خود را دارد و با انتخاب دقیق رسانه مناسب ، می توان از کشت موفقیت آمیز باسیلوس subtilis اطمینان حاصل کرد.
اگر علاقه مند به خرید باسیلوس باسیلوس با کیفیت بالا برای نیازهای تحقیق ، صنعتی یا کشاورزی خود هستید ، ما برای کمک به شما در اینجا هستیم. ما طیف گسترده ای از سویه های Bacillus subtilis را داریم که به خوبی مشخص و مناسب برای برنامه های مختلف هستند. برای اطلاعات بیشتر با ما تماس بگیرید و برای شروع مذاکره تهیه.
منابع
- Madigan ، MT ، Martinko ، JM ، Bender ، KS ، Buckley ، DH ، & Stahl ، DA (2018). زیست شناسی بروک میکروارگانیسم ها. پیرسون
- Pelczar ، MJ ، Chan ، ECS ، & Krieg ، NR (1993). میکروبیولوژی: مفاهیم و برنامه ها. مک گرا - هیل.
- اطلس ، RM (2010). دفترچه راهنمای رسانه های میکروبیولوژیکی. مطبوعات CRC.